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抗体常见问题之IHC
| 问题 | 原因 | 解决规划 |
|---|---|---|
| 边缘效应 | 组织边缘贴附不牢，，，，， ，，边缘组织松脱漂浮于液体中 | APES/多聚赖氨酸处置玻片 ；；；；；；；组织切片尽量。。。。 ；；；；；；；尽量预防选用坏死较多的组织 |
| 试剂未充分覆盖组织 | 滴加试剂时让试剂齐全覆盖组织 | |
| 非特异性染色体 | 抗体质量问题 | 使用质量有保障的抗体 |
| 抗体孵育功夫长 | 削减孵育功夫 | |
| 抗体浓度过高 | 降低抗体浓度 | |
| 一抗为多抗 | 使用单克隆抗体 | |
| 内源性过氧化物酶及生物素 | 耽搁灭活功夫 | |
| 封关不及 | 耽搁封关功夫 | |
| DAB孵育功夫过久或浓度过高 | 按说明书配置试剂，，，，， ，，镜下节造反映功夫 | |
| 抗体孵育后洗涤不充分 | 每次孵育之后洗3*5次 | |
| 滴加试剂时干片 | 实时滴加试剂 | |
| 切片在缓冲液中浸泡过久 | 抗原建复之后实时封关加一抗，，，，， ，，不能过夜 | |
| 阴性了局 | 抗体浓度及质量 | 选择有质量保障的抗体，，，，， ，，先做预尝试摸索抗体使用浓度 |
| 抗原建复不全 | 摸索相宜的抗原建复方式及建复功夫 | |
| 抗原丰度 | 正常阴性 | |
| 封关功夫过长 | 削减封关功夫 | |
| DAB孵育功夫短 | 镜下节造显色功夫 | |
| 细胞通透不全，，，，， ，，抗体未能进入细胞反映 | 选择相宜的通透剂及其反映功夫 | |
| 一抗二抗不匹配 | 选择正确起源的二抗 | |
| 脱片 | 玻片未处置好 | 玻片洗濯干净后用APES或多聚赖氨酸处置 |
| 切片厚薄不均匀 | 更换刀片 ；；；；；；；调整好切片机状态 | |
| 烤片功夫或温度不够 | 60摄食度2幼时 | |
| 组织自身问题 | 肿瘤坏死组织及骨组织自身易脱片 | |
| 抗原建复时温度迅速变动 | 抗原建复后让其天然冷却 | |
| 操作时使劲过猛 | 有脱片嫌疑的切片不要使劲甩，，，，， ，，用吸水纸吸干残存液体 | |
| 染色弱 | 抗体浓度低，，，，， ，，孵育功夫短 | 提高抗体浓度，，，，， ，，耽搁反映功夫 |
| 试剂使用超过有效期 | 试剂按时更新 | |
| 滴加试剂时残存缓冲液过多使试剂稀释 | 滴加试剂前尽量削减残存液体 | |
| 封关过度 | 削减封关功夫 | |
| 着色不均匀 | 切片厚度不一致 | 更换刀片 ；；；；；；；调整好切片机状态 |
| 试剂配造未混匀使部门浓度不一致 | 试剂充分混匀后滴加 | |
| 试剂未齐全覆盖组织 | 滴加试剂时让试剂齐全覆盖组织 | |
| 脱蜡不齐全 | 更换脱蜡剂或耽搁脱蜡功夫 |