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| 中文名称 |
总胆固醇(TC)含量试剂盒-微量法 |
| 规格 | 96样 |
| 货号 |
L-739-SH |
| 价值 | ¥390 |
| 样本类型 | 血清,,,,,血浆,,,,,组织匀浆,,,,,细胞裂解液、细胞造就上清液等 |
| 检测领域 | 详见说明书 |
| 检测步骤 |
微量法 |
| 货期 | 3-5天 |
| 说明书 | 征询我司业务员获取 |
| 文件 | 征询我司业务员获取 |
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差距大的样本做预测定。。。。。。。。
测定意思:
TC蕴含游离胆固醇和胆固醇酯。。。。。。。。TC是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。。。。。。。。
测定道理:
利用酯酶催化胆固醇酯水解天生游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),,,,,从而把胆固醇酯转化为FC;;;;;;;进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化,,,,,天生△4-胆甾烯酮和H2O2;;;;;;;最后利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,,,,,天生红色醌类化合物;;;;;;;在500nm有特点吸收峰,,,,,其色彩深浅与TC含量成正比。。。。。。。。
自备仪器和用品:
水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板。。。。。。。。
试剂组成和配置:
试剂一:异丙醇100mL(自备);;;;;;;
试剂二:液体20mL×1瓶,,,,,4℃保留;;;;;;;
试剂三:粉剂×1瓶,,,,,4℃保留;;;;;;;
试剂四:液体40μL×1瓶,,,,,4℃保留;;;;;;;
TC尺度品:液体1mL×1支,,,,,0.5μmol/mL,,,,,4℃保留。。。。。。。。
TC的提取。。。。。。。
1、组织中TC的提取。。。。。。。阂勒兆橹柿浚g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,,,,,参与1mL试剂一)进行冰浴匀浆,,,,,8000g 4℃离心10min,,,,,取上清,,,,,即TC待测液。。。。。。。。
2、细胞、细菌中TC的提取。。。。。。。先网络400-500万细胞或细菌到离心管内,,,,,弃上清,,,,,加1mL试剂一,,,,,超声波破碎1min(强度20%,,,,,超声2s,,,,,停1s),,,,,即TC待测液。。。。。。。。
3、血清(浆)等样品:直接测定。。。。。。。。
测定操作:
1. /酶标仪预热30 min,,,,,调节波长到500 nm。。。。。。。。
2. TC工作液的配造:临用前,,,,,汲取约0.8mL试剂二别离参与试剂三和试剂四瓶中,,,,,充分溶化后再全数转移回试剂二瓶中,,,,,充分混匀,,,,,TC工作液置于37℃水浴10min。。。。。。。。用不完的工作液4℃保留一周。。。。。。。。
3. 尺度管:顺次在96孔板中参与20μL FC尺度液和180μL TC工作液,,,,,混匀,,,,,37℃静置3h后于500nm测定A尺度管。。。。。。。。
4. 测定管:顺次在96孔板中参与20μL FC待测液和180μLTC工作液,,,,,混匀,,,,,37℃静置3h后于500nm测定A测定管。。。。。。。。
5. 空缺管:顺次在96孔板中参与20μL 试剂一和180μLTC工作液,,,,,混匀,,,,,37℃静置3h后于500nm测定A测定管。。。。。。。。
把稳:尺度管和空缺管只需测定一次。。。。。。。。
推算公式:
1. 血清(浆)中TC含量推算:
TC(μ mol /dL)=C尺度液×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)×100
=50×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)
C尺度液:0.5μmol/mL;;;;;;;100 mL:1dL=100 mL。。。。。。。。
2. 组织中TC含量推算:
(1)按样本蛋白浓度推算
TC(μ mol / mg prot)= C尺度液×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷Cpr
= 0.5×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷Cpr
(2)按样本质量推算
TC(μ mol / g 鲜沉)= C尺度液×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷W
= 0.5×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷W
C尺度液:0.5μmol/mL;;;;;;;样本蛋白浓度,,,,,mg/mL;;;;;;;W:样本质量,,,,,g/mL
3. 细胞、细菌中TC含量推算:
TC(μ mol /104 cell)=C尺度液×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷细菌或细胞(104 cell /L)
=0.5×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷细菌或细胞(104 cell /L)
C尺度液:0.5μmol/mL。。。。。。。。
最低检出限为1nmol/mL。。。。。。。。
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