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说话：Eng
生化试剂盒
- 还原糖含量试剂盒-可见分光光度法
-
测定道理：
加热推进碱性溶液中3,5-二硝基水杨酸溶液与还原糖天生棕红色氨基化合物，，，，，，在540nm有特点吸收峰 ；；；； ；在肯定的浓度领域内，，，，，，还原糖含量与540nm吸光度成线性关系，，，，，，凭据尺度曲线，，，，，，即可求出样品中还原糖的量。。。。。。
| 中文名称 |
还原糖含量试剂盒 |
| 规格 | 48样 |
| 货号 |
E-316-SH |
| 价值 | ￥500 |
| 样本类型 | 血清，，，，，，血浆，，，，，，组织匀浆，，，，，，细胞裂解液、细胞造就上清液等 |
| 检测领域 | 详见说明书 |
| 检测步骤 |
可见分光光度法 |
| 货期 | 3-5天 |
| 说明书 | 征询我司业务员获取 |
| 文件 |
征询我司业务员获取 |
注 意 ：正式测定前务必取2-3个预期差距较大的样本做预测定
测定意思：
还原糖宽泛存在于动物、植物、微生物和造就细胞钟祝。。。。。植物体内的还原糖重要蕴含葡萄糖、果糖和麦芽糖等，，，，，，是最常见的单糖和双糖，，，，，，其中葡萄糖和果糖不仅是呼吸作用的重要底物，，，，，，也是进一步合成蔗糖、淀粉和纤维素的底物。。。。。。
测定道理：
加热推进碱性溶液中3,5-二硝基水杨酸溶液与还原糖天生棕红色氨基化合物，，，，，，在540nm有特点吸收峰 ；；；； ；在肯定的浓度领域内，，，，，，还原糖含量与540nm吸光度成线性关系，，，，，，凭据尺度曲线，，，，，，即可求出样品中还原糖的量。。。。。。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、蒸馏水。。。。。。
试剂的组成和配造：
试剂一：100mL×1瓶，，，，，，4℃保留 ；；；； ；
试剂二：15mL×1瓶 ，，，，，，4℃保留 ；；；； ；
样品中还原糖的提取：
1、细菌或细胞的处置：网络细菌或细胞到离心管内，，，，，，离心后弃上清 ；；；； ；依照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议1000万细菌或细胞参与2mL试剂一），，，，，，超声波破碎细菌或细胞（冰浴！。。。。，，，，功率20％或200W，，，，，，超声3S，，，，，，距离10S，，，，，，沉复30次），，，，，，转移到有盖离心管中（预防加热时水分消散），，，，，，80℃水浴中40min并且振荡8~10次，，，，，，8000g，，，，，，25℃离心10min，，，，，，取上清供测定用。。。。。。
2、组织的处置：依照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.2g组织，，，，，，参与2mL试剂一），，，，，，冰浴匀浆，，，，，，转移到有盖离心管中（预防加热时水分消散），，，，，，80℃水浴中40min并且振荡8~10次，，，，，，8000g，，，，，，25℃离心10min，，，，，，取上清供测定用。。。。。。
3、血清（浆）的处置：依照血清（浆）体积（mL）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议取0.2mL血清（浆）参与2mL试剂一），，，，，，冰浴匀浆，，，，，，转移到有盖离心管中（预防加热时水分消散），，，，，，80℃水浴中40min并且振荡8~10次，，，，，，8000g，，，，，，25℃离心10min，，，，，，取上清供测定用。。。。。。
测定步骤：
1、 分光光度计预热30min以上，，，，，，调节波长至540nm，，，，，，蒸馏水调零。。。。。。
2、 调节水浴锅至95℃。。。。。。
3、 在EP管中参与下列试剂：
|
试剂（μL） |
对照管 |
测定管 |
|
样本 |
700 |
700 |
|
试剂二 |
|
500 |
|
蒸馏水 |
500 |
|
将各管摇匀，，，，，，在95℃水浴中加热5min（盖紧，，，，，，预防水分消散），，，，，，取出后立即冷却至室温，，，，，，混匀。。。。。。在540nm波长下读取对照管和测定管吸光值。。。。。。推算ΔA=A测定-A对照。。。。。。每个测定管需设一个对照管。。。。。。
把稳：若是ΔA大于2，，，，，，必要将样本用试剂一稀释，，，，，，推算公式中乘以相应稀释倍数（若显色后出现分层景象，，，，，，可改用蒸馏水稀释）。。。。。。
还原糖含量推算：
1、尺度前提下测定回归方程为y = 8.3796x- 0.3034 ；；；； ；x为尺度品浓度（mg/mL），，，，，，y为吸光值。。。。。。
2、按样本鲜沉推算：
还原糖(μg/g鲜沉)=[1000×(ΔA＋0.3034)÷ 8.3796×V1]÷(W×V1÷V2)=238.67×(ΔA＋0.3034)÷W
3、按样本蛋白浓度推算：
还原糖(μg/mg prot)=[1000×(ΔA＋0.3034)÷ 8.3796×V1]÷(V1×Cpr)=119.34×(ΔA＋0.3034)÷Cpr
4、按细菌或细胞密度推算：
还原糖(μg /104 cell)=[1000×(ΔA＋0.3034)÷ 8.3796×V1]÷（1000×V1÷V2）=0.239×(ΔA＋0.3034)
5、按血清（浆）体积推算：
还原糖(μg/mL)=[1000×(ΔA＋0.3034)÷ 8.3796×V1]÷（V3×V1÷V2）=1193.4×(ΔA＋0.3034)
1000：1mg/mL=1000?g/mL ；；；； ；V1：参与样本体积，，，，，，0.7mL ；；；； ；V2：参与提取液体积，，，，，，2 mL ；；；； ；V3：参与血清（浆体积），，，，，，0.2mL ；；；； ；Cpr：样本蛋白质浓度，，，，，，mg/mL ；；；； ；W：样本质量，，，，，，g ；；；； ；1000：细菌或细胞总数，，，，，，1000万。。。。。。
把稳：最低检测限为1mg/g鲜沉或10μg/mg prot
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