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生化试剂盒

植物淀粉含量试剂盒-微板法

测定意思:

淀粉是植物中糖的重要贮存大局 ,,,,,,,其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有沉要意思。 。 。。。。

 

测定道理:

利用80%乙醇能够把样品中可溶性糖与淀粉分隔 ,,,,,,,进一步选取酸水解法分化淀粉为葡萄糖 ,,,,,,,选取蒽酮比色法测定葡萄糖含量 ,,,,,,,即可推算淀粉含量。 。 。。。。

中文名称 植物淀粉含量试剂盒
规格 96样
货号

E-354-SH

价值 ¥1500
样本类型 血清 ,,,,,,,血浆 ,,,,,,,组织匀浆 ,,,,,,,细胞裂解液、细胞造就上清液等
检测领域 详见说明书
检测步骤 微板法
货期 3-5天
说明书 征询我司业务员获取
文件 征询我司业务员获取


    正式测定前务必取2-3个预期差距较大的样本做预测定

测定意思:

淀粉是植物中糖的重要贮存大局 ,,,,,,,其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有沉要意思。 。 。。。。

 

测定道理:

利用80%乙醇能够把样品中可溶性糖与淀粉分隔 ,,,,,,,进一步选取酸水解法分化淀粉为葡萄糖 ,,,,,,,选取蒽酮比色法测定葡萄糖含量 ,,,,,,,即可推算淀粉含量。 。 。。。。

 

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、浓硫酸(不允许快递)和蒸馏水。 。 。。。。

 

试剂的组成和配造:

试剂一:液体100mL×1瓶 ,,,,,,,4℃保留;; ;;;;;

试剂二:液体105mL×1瓶 ,,,,,,,4℃保留;; ;;;;;

试剂粉剂×1瓶 ,,,,,,,4℃保留;; ;;;;;

 

淀粉提取 。 。。。。 

1、 称取0.1~0.2g新鲜样本(建议称取约0.1g新鲜样本)于研钵中研碎 ,,,,,,,参与1mL试剂一 ,,,,,,,充分匀浆后转移到EP管中 ,,,,,,,80℃水浴提取30min ,,,,,,,3000g ,,,,,,,25℃离心5min ,,,,,,,弃上清 ,,,,,,,留沉淀。 。 。。。。

2、 沉淀中参与0.5mL蒸馏水 ,,,,,,,放入95℃水浴中糊化15min(盖紧 ,,,,,,,以预防水分消散)。 。 。。。。

3、 冷却后 ,,,,,,,参与0.35mL试剂二 ,,,,,,,25℃常温提取15min ,,,,,,,振荡3-5次。 。 。。。。

4、 参与0.85mL蒸馏水 ,,,,,,,混匀 ,,,,,,,3000g ,,,,,,,25℃离心10min ,,,,,,,取上清液待测。 。 。。。。

把稳:如样本为淀粉含量较高的干样 ,,,,,,,为保障充分提取 ,,,,,,,可适当减幼取样量 ,,,,,,,如称取0.01g~0.02g干样 ,,,,,,,参与1mL试剂一 ,,,,,,,其余提取步骤同上。 。 。。。。

 

测定步骤:

1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上 ,,,,,,,调节波长至620nm ,,,,,,,蒸馏水调零。 。 。。。。

2、 调节水浴锅至95度。 。 。。。。

3、工作液的配造:临用前在试剂三中参与3.75mL蒸馏水后 ,,,,,,,缓慢参与21.25mL浓硫酸 ,,,,,,,不休搅拌 ,,,,,,,充分溶化 ,,,,,,,待用;; ;;;;;用不完的试剂4℃保留一周;; ;;;;;

4、样本测定:取50μL样本和250μL工作液至EP管中 ,,,,,,,95度水浴10 min(盖紧 ,,,,,,,预防水分消散) ,,,,,,,天然冷却至室温 ,,,,,,,200uL至微量石英比色皿或96孔板中 ,,,,,,,620 nm 波长下纪录测定吸光度值A。 。 。。。。

 

 

 

 

 

淀粉含量推算:

a.用微量石英比色皿测定的推算公式如下

尺度前提下测定的回归方程为y = 5.872x - 0.0295;; ;;;;;x尺度品浓度(mg/mL) ,,,,,,,y吸光。 。 。。。。

1依照蛋白浓度推算

淀粉含量(mg/mg prot)=[(A+0.0295)×V1]÷5.872 ÷(V1×Cpr)=0.17×(A+0.0295) ÷Cpr

2、按样本鲜沉推算

淀粉含量(mg/g 鲜沉)= [(A+0.0295)×V1] ÷5.872÷(W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W

V1:参与反映系统中样本体积 ,,,,,,,0.05mL;; ;;;;;V2:参与提取液体积 ,,,,,,,1.7 mL;; ;;;;;Cpr:样本蛋白质浓度 ,,,,,,,mg/mL;; ;;;;;W:样质量 ,,,,,,,g

 

b.96孔板测定的推算公式如下

尺度前提下测定的回归方程为y = 2.936x - 0.0295;; ;;;;;x尺度品浓度(mg/mL) ,,,,,,,y吸光。 。 。。。。

1依照蛋白浓度推算

淀粉含量(mg/mg prot)=[(A+0.0295)×V1]÷2.936 ÷(V1×Cpr)=0.34×(A+0.0295) ÷Cpr

2、按样本鲜沉推算

淀粉含量(mg/g 鲜沉)=[(A+0.0295)×V1]÷2.936÷(W×V1÷V2) =0.578×(A+0.0295) ÷W

V1:参与反映系统中样本体积 ,,,,,,,0.05mL;; ;;;;;V2:参与提取液体积 ,,,,,,,1.7 mL;; ;;;;;Cpr:样本蛋白质浓度 ,,,,,,,mg/mL;; ;;;;;W:样质量 ,,,,,,,g

 

把稳由于工作液拥有强侵蚀性 ,,,,,,,请审慎操作。 。 。。。。

      若吸光值大于1 ,,,,,,,请将样本用提取液稀释后再测定 ,,,,,,,推算公式中乘以相应的稀释倍数。 。 。。。。

提取液的配置0.35mL试剂二+1.35mL水。 。 。。。。用几多依照此比例配几多。 。 。。。。

最低检测限为10μg/g鲜沉或100ng/mgprot。 。 。。。。

 

 



    正式测定前务必取2-3个预期差距较大的样本做预测定

测定意思:

淀粉是植物中糖的重要贮存大局 ,,,,,,,其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有沉要意思。 。 。。。。

 

测定道理:

利用80%乙醇能够把样品中可溶性糖与淀粉分隔 ,,,,,,,进一步选取酸水解法分化淀粉为葡萄糖 ,,,,,,,选取蒽酮比色法测定葡萄糖含量 ,,,,,,,即可推算淀粉含量。 。 。。。。

 

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、浓硫酸(不允许快递)和蒸馏水。 。 。。。。

 

试剂的组成和配造:

试剂一:液体100mL×1瓶 ,,,,,,,4℃保留;; ;;;;;

试剂二:液体105mL×1瓶 ,,,,,,,4℃保留;; ;;;;;

试剂粉剂×1瓶 ,,,,,,,4℃保留;; ;;;;;

 

淀粉提取 。 。。。。 

1、 称取0.1~0.2g新鲜样本(建议称取约0.1g新鲜样本)于研钵中研碎 ,,,,,,,参与1mL试剂一 ,,,,,,,充分匀浆后转移到EP管中 ,,,,,,,80℃水浴提取30min ,,,,,,,3000g ,,,,,,,25℃离心5min ,,,,,,,弃上清 ,,,,,,,留沉淀。 。 。。。。

2、 沉淀中参与0.5mL蒸馏水 ,,,,,,,放入95℃水浴中糊化15min(盖紧 ,,,,,,,以预防水分消散)。 。 。。。。

3、 冷却后 ,,,,,,,参与0.35mL试剂二 ,,,,,,,25℃常温提取15min ,,,,,,,振荡3-5次。 。 。。。。

4、 参与0.85mL蒸馏水 ,,,,,,,混匀 ,,,,,,,3000g ,,,,,,,25℃离心10min ,,,,,,,取上清液待测。 。 。。。。

把稳:如样本为淀粉含量较高的干样 ,,,,,,,为保障充分提取 ,,,,,,,可适当减幼取样量 ,,,,,,,如称取0.01g~0.02g干样 ,,,,,,,参与1mL试剂一 ,,,,,,,其余提取步骤同上。 。 。。。。

 

测定步骤:

1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上 ,,,,,,,调节波长至620nm ,,,,,,,蒸馏水调零。 。 。。。。

2、 调节水浴锅至95度。 。 。。。。

3、工作液的配造:临用前在试剂三中参与3.75mL蒸馏水后 ,,,,,,,缓慢参与21.25mL浓硫酸 ,,,,,,,不休搅拌 ,,,,,,,充分溶化 ,,,,,,,待用;; ;;;;;用不完的试剂4℃保留一周;; ;;;;;

4、样本测定:取50μL样本和250μL工作液至EP管中 ,,,,,,,95度水浴10 min(盖紧 ,,,,,,,预防水分消散) ,,,,,,,天然冷却至室温 ,,,,,,,200uL至微量石英比色皿或96孔板中 ,,,,,,,620 nm 波长下纪录测定吸光度值A。 。 。。。。

 

 

 

 

 

淀粉含量推算:

a.用微量石英比色皿测定的推算公式如下

尺度前提下测定的回归方程为y = 5.872x - 0.0295;; ;;;;;x尺度品浓度(mg/mL) ,,,,,,,y吸光。 。 。。。。

1依照蛋白浓度推算

淀粉含量(mg/mg prot)=[(A+0.0295)×V1]÷5.872 ÷(V1×Cpr)=0.17×(A+0.0295) ÷Cpr

2、按样本鲜沉推算

淀粉含量(mg/g 鲜沉)= [(A+0.0295)×V1] ÷5.872÷(W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W

V1:参与反映系统中样本体积 ,,,,,,,0.05mL;; ;;;;;V2:参与提取液体积 ,,,,,,,1.7 mL;; ;;;;;Cpr:样本蛋白质浓度 ,,,,,,,mg/mL;; ;;;;;W:样质量 ,,,,,,,g

 

b.96孔板测定的推算公式如下

尺度前提下测定的回归方程为y = 2.936x - 0.0295;; ;;;;;x尺度品浓度(mg/mL) ,,,,,,,y吸光。 。 。。。。

1依照蛋白浓度推算

淀粉含量(mg/mg prot)=[(A+0.0295)×V1]÷2.936 ÷(V1×Cpr)=0.34×(A+0.0295) ÷Cpr

2、按样本鲜沉推算

淀粉含量(mg/g 鲜沉)=[(A+0.0295)×V1]÷2.936÷(W×V1÷V2) =0.578×(A+0.0295) ÷W

V1:参与反映系统中样本体积 ,,,,,,,0.05mL;; ;;;;;V2:参与提取液体积 ,,,,,,,1.7 mL;; ;;;;;Cpr:样本蛋白质浓度 ,,,,,,,mg/mL;; ;;;;;W:样质量 ,,,,,,,g

 

把稳由于工作液拥有强侵蚀性 ,,,,,,,请审慎操作。 。 。。。。

      若吸光值大于1 ,,,,,,,请将样本用提取液稀释后再测定 ,,,,,,,推算公式中乘以相应的稀释倍数。 。 。。。。

提取液的配置0.35mL试剂二+1.35mL水。 。 。。。。用几多依照此比例配几多。 。 。。。。

最低检测限为10μg/g鲜沉或100ng/mgprot。 。 。。。。

 

 

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