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说话:Eng

| 中文名称 |
游离胆固醇(FC)含量试剂盒-微量法 |
| 规格 | 96样 |
| 货号 |
L-743-SH |
| 价值 | ¥350 |
| 样本类型 | 血清,,,,,,血浆,,,,,,组织匀浆,,,,,,细胞裂解液、细胞造就上清液等 |
| 检测领域 | 详见说明书 |
| 检测步骤 |
微量法 |
| 货期 | 3-5天 |
| 说明书 | 征询我司业务员获取 |
| 文件 | 征询我司业务员获取 |
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差距大的样本做预测定。。。。。。。。
测定意思:
FC是组成细胞膜的重要成分,,,,,,也是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的沉要原料。。。。。。。。FC浓度可作为脂代谢的指标。。。。。。。。
测定道理:
FC氧化酶催化FC天生△4-胆甾烯酮和H2O2,,,,,,过氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚天生红色醌类化合物,,,,,,在500nm有吸收峰,,,,,,其色彩深浅与FC含量成正比。。。。。。。。
自备仪器和用品:
水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板、异丙醇和蒸馏水。。。。。。。。
试剂组成和配置:
试剂一:异丙醇100mL(自备);;;;;;;
试剂二:液体20mL×1瓶,,,,,,4℃保留;;;;;;;
试剂三:粉剂×1瓶,,,,,,4℃保留;;;;;;;
试剂四:液体40μL×1瓶,,,,,,4℃保留;;;;;;;
TC尺度品:液体1mL×1支,,,,,,0.5μmol/mL,,,,,,4℃保留。。。。。。。。
FC的提取。。。。。。。
1. 组织:依照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,,,,,,参与1mL试剂一)进行冰浴匀浆。。。。。。。。8000g,,,,,,4℃离心10min,,,,,,取上清置冰上待测。。。。。。。。
2.细菌、真菌:先网络400-500万细胞或细菌到离心管内,,,,,,弃上清,,,,,,加1mL试剂一,,,,,,超声波破碎1min(强度20%,,,,,,超声2s,,,,,,停1s),,,,,,即FC待测液。。。。。。。。
3.血清(浆)样品:直接测定。。。。。。。。
测定操作:
1. 酶标仪预热30 min,,,,,,调节波长到500 nm。。。。。。。。
2. FC工作液的配造:临用前,,,,,,汲取约0.8mL试剂二别离参与试剂三和试剂四瓶中,,,,,,充分溶化后再全数转移回试剂二瓶中,,,,,,充分混匀,,,,,,FC工作液置于37℃水浴10min。。。。。。。。用不完的工作液4℃保留一周。。。。。。。。
3. 尺度管:顺次在96孔板中参与20μL FC尺度液和180μL FC工作液,,,,,,混匀,,,,,,37℃静置3h后于500nm测定A尺度管。。。。。。。。
4. 测定管:顺次在96孔板中参与20μL FC待测液和180μL FC工作液,,,,,,混匀,,,,,,37℃静置3h后于500nm测定A测定管。。。。。。。。
5、空缺管:顺次在96孔板中参与20μL 试剂一和180μL FC工作液,,,,,,混匀,,,,,,37℃静置3h后于500nm测定
A测定管。。。。。。。。
当苦衷项:
1、 尺度管和空缺管只有做一管。。。。。。。。
2、 若测定管产生白色浑浊,,,,,,能够将待测液用异丙醇稀释2~5倍后测定,,,,,,并在最后了局乘以相应倍数。。。。。。。。
推算公式:
1. 血清(浆)中FC含量推算:
FC含量(μmol /dL)= C尺度液×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)×100mL
=50×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)
C尺度液:0.5μmol/mL;;;;;;;100 mL:1dL=100 mL。。。。。。。。
2. 组织中FC含量推算:
(1)按样本蛋白浓度推算
FC含量(μmol / mg prot)= C尺度液×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷Cpr
= 0.5×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷Cpr
(2)按样本鲜沉推算
FC含量(μmol / g 鲜沉)= C尺度液×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷W
= 0.5×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷W
C尺度液:0.5μmol/mL;;;;;;;Cpr:样本蛋白浓度,,,,,,mg/mL;;;;;;;W:样性质量,,,,,,g/mL
3. 细胞、细菌中FC含量推算:
FC含量(μmol /104 cell)= C尺度液×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷细菌或细胞(104 cell /L)
=0.5×(A测定管-A空缺管)÷(A尺度管-A空缺管)÷细菌或细胞(104 cell /L)
C尺度液:0.5μmol/mL。。。。。。。。
最低检出限为1nmol/mL。。。。。。。。
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