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人大幼胞病毒(HCMV) 检测试剂盒(酶联免疫法)
价值: 2000
货号:HY1298X-Hu
1.检测道理:
试剂盒选取双抗体夹心法道理:将人大幼胞病毒(HCMV)捕获抗体包被于酶标板上,,,,,,,捕获样品及对照品中待测物,,,,,,,参与辣根过氧化物酶象征的酶象征检测抗体,,,,,,,结合形成“抗体-抗原-抗体-HRP”免疫复合物,,,,,,,检测过程中游离的成分均被洗去。。。。。。。参与TMB显色液,,,,,,,在过氧化物酶(HRP)的催化作用下,,,,,,,若反映孔中有待测物则显蓝色,,,,,,,参与终止液,,,,,,,在酸的作用下造成黄色。。。。。。。用酶标仪在450 nm处测OD值,,,,,,,色彩的深浅和样本中的人大幼胞病毒(HCMV)呈正比,,,,,,,通过公式判定样本阴阳性。。。。。。。
试剂盒组分:
|
名 称 Label |
组成成分 Kit Components |
数量(48T) Quantity |
数量(96T) Quantity |
|
酶标板 |
预包被酶标板 |
8×6条 |
8×12条 |
|
阳性对照 |
阳性对照 |
0.5mL |
1mL |
|
阴性对照 |
阴性对照 |
0.5mL |
1mL |
|
酶象征物 |
HRP象征检测抗体 |
6mL |
12mL |
|
样品稀释液 |
PBS、BSA等 |
10mL |
15mL |
|
浓缩洗液(20×) |
20倍浓缩洗液 |
15mL |
2×15mL |
|
显色剂 |
TMB、过氧化氢 |
6mL |
12mL |
|
终止液 |
稀硫酸、抗沉淀剂 |
3mL |
6mL |
注明:有关试剂在分装时会比标签上表明的体积稍多一些,,,,,,,请在使用时量取而非直接倒出。。。。。。。
试剂筹备及贮存:
· 试剂盒各组分应贮存于2~8℃保留;;;;;;;;
· 使用前请确保试剂盒按划定的前提贮存,,,,,,,每次尝试仅筹备所需尝试用量的试剂;;;;;;;;
· 1×洗液的配造:浓缩洗液(20×)如有晶体析出,,,,,,,需在37℃下加热至晶体全数溶化后使用。。。。。。。用蒸馏水1:20稀释,,,,,,,例如:10mL浓缩洗涤液参与190mL的蒸馏水,,,,,,,混合均匀。。。。。。。配造好的洗液能够在室温保留1周。。。。。。。
7.检测法式:
使用前将所有试剂置于室温平衡30分钟左右,,,,,,,也可置于37℃温箱急剧回温至室温。。。。。。。
把稳:酶标板未复原室温前,,,,,,,请勿开封。。。。。。。
|
1 |
编号 |
合理铺排阳性对照孔、阴性对照孔、空缺孔、样品孔。。。。。。。 |
|
2 |
稀释 加样 |
阳性对照孔参与阳性对照100uL,,,,,,,阴性对照孔参与阴性对照100uL。。。。。。。阴阳对照各设置2孔。。。。。。。 样本孔先参与样品稀释液100uL,,,,,,,再参与样本10uL。。。。。。。 空缺孔不加样品不加酶,,,,,,,其余操作与样品孔一样。。。。。。。 |
|
3 |
温育 |
盖上封板膜,,,,,,,在37℃下孵育30分钟 |
|
4 |
洗板 |
洗板5次,,,,,,,最后一次洗板后倒扣酶标板,,,,,,,在干净的吸水纸上拍去残液。。。。。。。 |
|
5 |
加酶 |
每孔参与酶象征物100μL。。。。。。?????杖笨祝翰患用赶笳魑铩!!。。。。 |
|
6 |
温育 |
盖上封板膜,,,,,,,在37℃下孵育30分钟。。。。。。。 |
|
7 |
洗板 |
洗板5次,,,,,,,最后一次洗板后倒扣酶标板,,,,,,,在干净的吸水纸上拍去残液。。。。。。。 |
|
8 |
显色 |
每孔参与显色剂100uL,,,,,,,37℃避鲜明色15分钟。。。。。。。 |
|
9 |
终止 |
每孔加终止液 50uL。。。。。。。 |
|
10 |
测定 |
使用酶标仪在450nm检测波长及620-690nm参比波长前提下测定吸光度值,,,,,,,若是没有参比波长则仅选择450nm波上进行检测。。。。。。。 |
8.检测法式总结:
|
步骤 |
试剂 |
体积 |
孵育功夫 |
孵育温度 |
洗涤次数 |
|
1 |
加样 |
100ul |
30分钟 |
37℃ |
5次 |
|
2 |
加酶 |
100ul |
30分钟 |
37℃ |
5次 |
|
3 |
加显色液 |
100ul |
15分钟 |
37℃,,,,,,,避光 |
无 |
|
4 |
加终止液 |
50ul |
无 |
无 |
无 |
|
5 |
参与终止液后5分钟内用酶标仪在 450nm 处测吸光值 |
||||
9. 阳性判断值Cut-Off:
Cut-Off =阴性对照孔均匀OD值×2.1(阴性对照孔OD均值幼于0.050时,,,,,,,按0.050推算)。。。。。。。
例:阴性对照孔均匀OD值为0.100,,,,,,,则Cut-OFF值=0.100×2.1=0.210;;;;;;;;
阴性对照孔均匀OD值为0.020,,,,,,,则Cut-OFF值=0.050×2.1=0.105。。。。。。。
| 人血管严重素转化酶1(ACE1)ELISA试剂盒 |
| 人血管严重素原(aGT)ELISA试剂盒 |
| 人血管严重素II1型受体自身抗体(AT1-AA)ELISA试剂盒 |
| 人血管严重素Ⅱ受体2(AT2R)ELISA试剂盒 |
| 人血管严重素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)ELISA试剂盒 |
| 人血管严重素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒 |
| 人血管严重素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)ELISA试剂盒 |
| 人血管严重素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒 |
| 人血管严重素1-7(ANG 1-7 )ELISA试剂盒 |
| 人血管加压素(AVP)ELISA试剂盒 |
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