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牛呼吸路合胞病毒(BRSV)检测试剂盒
(酶联免疫法)
规格: 96T价值 :¥2000
检测道理:
试剂盒选取双抗体夹心法道理:将牛呼吸路合胞病毒(BRSV)捕获抗体包被于酶标板上,,,,,,,,捕获样品及对照品中待测物,,,,,,,,参与辣根过氧化物酶象征的酶象征检测抗体,,,,,,,,结合形成“抗体-抗原-抗体-HRP”免疫复合物,,,,,,,,检测过程中游离的成分均被洗去。。。。。。。。参与TMB显色液,,,,,,,,在过氧化物酶(HRP)的催化作用下,,,,,,,,若反映孔中有待测物则显蓝色,,,,,,,,参与终止液,,,,,,,,在酸的作用下造成黄色。。。。。。。。用酶标仪在450 nm处测OD值,,,,,,,,色彩的深浅和样本中的牛呼吸路合胞病毒(BRSV)呈正比,,,,,,,,通过公式判定样本阴阳性。。。。。。。。
2.试剂盒组分:
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名 称 Label |
组成成分 Kit Components |
数量(48T) Quantity |
数量(96T) Quantity |
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酶标板 |
预包被酶标板 |
8×6条 |
8×12条 |
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阳性对照 |
阳性对照 |
0.5mL |
1mL |
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阴性对照 |
阴性对照 |
0.5mL |
1mL |
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酶象征物 |
HRP象征检测抗体 |
6mL |
12mL |
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样品稀释液 |
PBS、BSA等 |
10mL |
15mL |
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浓缩洗液(20×) |
20倍浓缩洗液 |
15mL |
2×15mL |
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显色剂 |
TMB、过氧化氢 |
6mL |
12mL |
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终止液 |
稀硫酸、抗沉淀剂 |
3mL |
6mL |
注明:有关试剂在分装时会比标签上表明的体积稍多一些,,,,,,,,请在使用时量取而非直接倒出。。。。。。。。
3.尝试所需自备仪器耗材:
酶标仪(450nm波长滤光片)
精密单路、多路移液器、吸头、加样槽、烧杯、量筒、吸水滤等
蒸馏水或去离子水
自动洗板机(也可手动洗板)
37℃水浴锅或恒温箱
EP管(用于稀释校准品及样本)
无粉一次性乳胶手套
微孔板振荡器(如有必要)、离心理、旋涡振荡器等辅助设备
用于数据分析的统计拟合软件(Origin,ELISA Calc)等
4.样本采集与保留
血清:将网络于血清分离管的全血标本在室温搁置0.5-2幼时或4℃过夜,,,,,,,,而后1000×g离心20 分钟,,,,,,,,取上清即可,,,,,,,,或将上清置于-20℃或-80℃保留,,,,,,,,但应预防反复冻融。。。。。。。。
血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,,,,,,,,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,,,,,,,,取上清即可检测,,,,,,,,或将上清置于-20℃或-80℃保留,,,,,,,,但应预防反复冻融。。。。。。。。
细胞提取液:贴壁细胞用冷的PBS轻轻洗濯,,,,,,,,而后用胰蛋白酶消化,,,,,,,,1000×g离心5分钟后网络细胞;;;;;;悬浮细胞可直接离心网络。。。。。。。。网络的细胞用冷的PBS洗涤3次。。。。。。。。每5x105个细胞中参与150-500μL PBS沉悬(推荐在PBS中参与蛋白酶抑造剂;;;;;;若含量很低可削减PBS的体积)并通过反复冻融或超声使细胞破碎。。。。。。。。将提取液于2-8℃,,,,,,,,1500×g离心10分钟,,,,,,,,取上清检测,,,,,,,,或将上清置于-20℃或-80℃保留,,,,,,,,但应预防反复冻融。。。。。。。。
细胞上清:网络细胞造就液,,,,,,,,1000×g离心20分钟,,,,,,,,取上清即可检测,,,,,,,,或将上清置于-20℃或-80℃保留,,,,,,,,但应预防反复冻融。。。。。。。。
组织匀浆液:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲刷组织,,,,,,,,去除残 留血液,,,,,,,,称沉后将组织剪碎。。。。。。。。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的沉量体积比,,,,,,,,好比1 g的组织样品对应9 mL的PBS,,,,,,,,具体体积可凭据尝试必要适当调整,,,,,,,,并做好纪录。。。。。。。。推荐在PBS中参与蛋白酶抑造剂)参与玻璃匀浆器中,,,,,,,,在冰上充分研磨。。。。。。。。为了进一步裂解组织细胞,,,,,,,,能够对匀浆液进行反复冻融或超声破 碎。。。。。。。。最后将匀浆液于2-8℃,,,,,,,,5000×g离心5-10分钟,,,,,,,,取上清即可检测,,,,,,,,或将上清置于-20℃或-80℃保留,,,,,,,,但应预防反复冻融。。。。。。。。
5.当苦衷项:
试剂盒当苦衷项
本试剂盒仅供体表钻研使用,,,,,,,,不用于临床诊断。。。。。。。。
试验中请穿戴尝试服并戴乳胶手套做好防护工作。。。。。。。。出格是检测血液或者其他体液样品时,,,,,,,,请按国度生物试验室安全防护条例执杏祝。。。。。。。
刚开启的酶标板孔中可能会有一些水样物质,,,,,,,,此为正常景象,,,,,,,,不会对尝试了局造成任何影响。。。。。。。。
检测使用的酶标仪必要装置能检测450±2 nm波长的滤光片,,,,,,,,光密度领域在0-3.5之间。。。。。。。。
请勿使用其他批号或其他起源的试剂混合或代替本试剂盒中的试剂。。。。。。。。
试验中所用的EP管和吸头均为一次性使用,,,,,,,,严禁混用。。。。。。。。
请勿使用过期的试剂。。。。。。。。
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