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为了维持hESC存活且拥有多能性,,,,,,钻研人员通常在滋养层细胞(也就是一层幼鼠胚胎成纤维细胞)上造就,,,,,,或者在微载体上成簇造就。。。。。。。。但是在这些基质上造就干细胞是相当昂贵的,,,,,,并且造就物不能在很长功夫内维持未分化状态,,,,,,只管所有必须的成长因子都存在。。。。。。。。
钻研团队在钻研hESC簇分化成神经细胞,,,,,,他们一向在使用Invitrogen的Neurobasal造就基。。。。。。。。这种造就基可能在无滋养层的前提下长功夫维持神经细胞的成长和正常表型。。。。。。。。在钻研过程中,,,,,,钻研人员把稳到并非所有细胞都分化了。。。。。。。。他们疑惑是造就基的选择导致了这种景象,,,,,,因而他们起头集中精力钻研造就基若何推进干细胞成长并抑造分化。。。。。。。。
为了验证他们的理论,,,,,,钻研幼组定造了造就基。。。。。。。。他们在Neurobasal造就基中参与了血清代替物,,,,,,还参与了干细胞成长所需的蛋白,,,,,,蕴含细胞表基质组分 神经营养因子 成纤维细胞成长因子2和活化素A。。。。。。。。钻研人员在通例的无血清造就基和定造造就基中造就了hESC。。。。。。。。三个星期之后,,,,,,定造造就基中存在更多的未分化hESC细胞。。。。。。。。
使这种新的造就基,,,,,,钻研幼组检验了三种分歧的hESC系。。。。。。。。他们利用荧光激活细胞分选(FACS)在7周和20周后分析了造就物,,,,,,发现90%的细胞仍维持多能性。。。。。。。。这项突破为在推算机化的自动系统中大规模扩增胚胎干细胞创造了可能性。。。。。。。。此表,,,,,,通过扭转造就前提,,,,,,还可能进一步领导干细胞长成特定的细胞类型,,,,,,用于钻研或病人的移植。。。。。。。。
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