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行业新闻
谷胱甘肽ELISA测定尝试齐全攻略
简介：
谷胱甘肽的测定尝试能够用于：（1）检测药品中谷胱甘肽的存在以及含量；；；；；；（2）谷胱甘肽拥有广谱解毒作用，，，，，不仅可用于药物，，，，，更可作为职能性食品的基料，，，，，在延缓衰老、加强免疫力、抗肿瘤等职能性食品宽泛利用
一、资料筹备
1. 包被液：0.05 mol/l（pH9.6）碳酸盐缓冲液：Na2CO3 0.159 g，，，，，NaHCO3 0.294 g，，，，，用蒸馏水溶化后，，，，，定容至100 ml。。。。。。。。
2. PBS-T洗涤液：0.01mol/ pH7.4磷酸盐-氯化钠缓冲液：NaCl 8.0 g，，，，，KH2PO4 0.2 g，，，，，Na2HPO4·12H2O 2.9 g，，，，，KCl 0.2 g，，，，，吐温-20 0.5 ml，，，，，用蒸馏水溶化后，，，，，定容至1000 ml。。。。。。。。
3. 底物溶液3，，，，，3’，，，，，5,5‘-四甲基联苯胺（TMB）贮存液及利用液：
（1）0.1 mol/l pH6.8 PBS：Na2HPO4·12H2O 1.09 g，，，，，NaH2PO4·H2O 6.05 g，，，，，蒸馏水溶化后定容至500 ml，，，，，4℃保留备用。。。。。。。。
（2）TMB贮备液：TMB 60 mg 溶于10 ml 二甲基亚砜（DMSO）中4℃保留备用。。。。。。。。
（3）TMB利用液：临用前取0.1 mol/l pH6.0 PBS 10 ml，，，，，TMB贮备液100 ul，，，，，30%H2O2 15 ul 混匀即可。。。。。。。。
二、尝试步骤
1. 抗体包被
（1）抗体用包被液稀释至20 ug/ml，，，，，参与聚苯乙烯反映板中每孔100 ul，，，，，加盖后放4℃过夜。。。。。。。。
（2）倾去孔内液体，，，，，参与洗涤液后静置3 min，，，，，倾尽洗涤液，，，，，沉复洗涤3次。。。。。。。。
（3）将反映板口在吸水纸上，，，，，以除尽液体。。。。。。。。
2. 封关：每孔参与200 ul封关液，，，，，37℃孵育60 min，，，，，而后洗涤3次。。。。。。。。
3. 参与待测血清，，，，，37℃温育1~2 h，，，，，洗涤3次。。。。。。。。用稀释液作对照孔，，，，，尺度曲线的造备是用不容稀释度的纯GST-τ祝。。。。。。。
4. 加酶标抗体：按要求稀释抗GST-π-IgG-HRP，，，，，每孔100 ul，，，，，37℃温育1 h，，，，，而后洗涤5次，，，，，扣在吸水纸上吸干水分。。。。。。。。
5. 显色：参与TMB利用液，，，，，置室温反映15~30 min，，，，，参与50 ul 2 mol/l H2SO4，，，，，不变3~5 min，，，，，即可比色。。。。。。。。
6. 比色：用酶标仪，，，，，以PBS-T孔为对照，，，，，波长450 nm，，，，，测各孔光吸收度（A），，，，，查尺度曲线，，，，，即可测得GST-π含量。。。。。。。。
参考文件：
1.【文件标题】Tissue engineered artificial liver model based on viscoelastic hyaluronan-collagen hydrogel and the effect of EGCG intervention on ALD
2.【文件标题】Analysis of the effect of probucol-mecobalamin tablets combination on oxidative stress in patients with diabetic peripheral neuropathy