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热点资讯:ELISA有关知识解答
1、问：做间接Elisa法测试幼鼠血清中的IgE抗体，，，，，，设空缺对照、和阴性对照、阳性血清稀释倍数为5千、1万、10万、20万不等，，，，，，用的是生物素象征的羊抗鼠IgE抗体，，，，，，和亲和素的辣根过氧化物酶。。。 。？？？？？？５橇司殖丝杖倍哉湛酌挥猩时，，，，，，其余各孔全有色彩，，，，，，并且OD值都相差不大，，，，，，为什么?
回覆：可能原因如下：
(1) 水质被金属离子等传染;预防法子尽量使用新鲜水或蒸馏水。。。 。。
(2) 洗涤不充分，，，，，，样品中其它成分残留或酶残留;预防法子洗涤液应注满微孔，，，，，，充分洗涤。。。 。。
(3) 移液头沉复使用，，，，，，未洗净或消毒不齐全; 预防法子移液头要一次性使用。。。 。。
(4) 酶标板活络度过高。。。 。。
(5) 一抗显色功夫的节造等等，，，，，，关于ELISA的每一步都要把稳才杏祝。。 。。
2、ELISA加样时的防错幼经验
(1)用一张写满字的纸，，，，，，字越多越好，，，，，，好比报纸，，，，，，垫鄙人面，，，，，，这样，，，，，，加过标本的幼孔看从前下面的字会变幼，，，，，，没加的字正常，，，，，，极度容易分辨。。。 。。
(2)能够利用液面反光与没有加的孔加以区别
(3)在标本加完后，，，，，，再把加样枪全压下，，，，，，使液面产生幼气泡，，，，，，也能够加以分辨
3、棋盘试验的操作步骤:
(1)将抗原按肯定的梯度倍比稀释后，，，，，，依照ELISA从上到下(或者从左到右)的挨次包被。。。 。。
(2)将抗体按肯定的梯度倍比稀释后依照ELISA从左到右或者从上到下参与。。。 。。
(3)二抗的稀释倍数是肯定的，，，，，，而后显色，，，，，，读值。。。 。。
OD值的测按时，，，，，，波长要凭据显色剂的分歧而定，，，，，，通常上各人都使用TMB显色，，，，，，450nm读值。。。 。。凭据读值得了局能够选定相宜的抗原和抗体效价，，，，，，这就是棋盘尝试的主张，，，，，，若是抗原包被量已知而二抗的工作浓度不确定的话就用一抗和二抗作棋盘试验。。。 。。
