产品名称:Cell Counting Kit-8 细胞增殖及毒性检测试剂盒(CCK-8),加强型
产品编号:HYCCK-8241
产品组成 500T
CCK-8 加强型溶液 5ml
产品价值:299元
产品简介
Cell Counting Kit-8(简称CCK-8),,,,,是一种基于WST-8而宽泛利用于细胞增殖和细胞毒性的急剧、高活络度检测的试剂河祝。。。。CCK-8试剂中含有WST-8(化台甫:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐)是一种类似于MTT的化合物,,,,,它在电子耦合试剂1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)存在前提下,,,,,能够被线粒体内的脱氢酶还原为拥有高度水溶性的橙黄色甲瓒产品Formazan (参考图1),,,,,天生的Formazan数量与活细胞的数量成正比。。。。。因而可利用这一个性直接进行细胞增殖和毒性分析,,,,,细胞增殖越多越快,,,,,则色彩越深;;;;;;;;细胞毒性越大,,,,,则色彩越浅。。。。。
操作步骤
造作尺度曲线(测定细胞具体数量时)
1.造备细胞悬液:细胞计数。。。。。
2.接种到 96 孔板中:按比例(例如:1/2 比例)顺次用造就基等比稀释成一个细胞浓度梯度,,,,,通常要做 3-5 个细胞浓度梯度,,,,,每组 3-6 个沉复孔。。。。。每孔约 100μl 细胞悬液。。。。。
3.37℃造就箱中造就:细胞接种后贴壁约莫必要造就 2-4 幼时,,,,,若是不必要贴壁,,,,,这步能够省去。。。。。
4.每孔参与 10μl CCK-8 加强型溶液:由于每孔参与 CCK-8 量比力少,,,,,有可能因试剂沾在孔壁带来误差,,,,,建议在加完试剂后轻轻敲击造就板以援手混匀。。。。;;;;;;;;蛘咧苯优渲煤 10% CCK-8 的造就基,,,,,以换液的大局参与。。。。。把稳不要在孔中天生气泡,,,,,以免影响吸光度的检测。。。。。
5.造就箱内孵育一按功夫后测定 450nm 吸光度,,,,,造作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),,,,,吸光度为纵坐标(Y 轴)的尺度曲线。。。。。凭据此尺度曲线能够测定出未知样品的细胞数量(使用此尺度曲线的前提是尝试的前提要一致,,,,,便于确定细胞的接种数量以及参与 CCK-8 后的造就功夫。。。。。)
保留前提:4℃避光保留,,,,,一年有效。。。。。-20 ℃能够贮藏更久,,,,,但反复冻融会增长布景值,,,,,滋扰尝试测定,,,,,因而请将时时使用的试剂保留在4 ℃。。。。。