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大鼠糖化血红蛋白(GHb)酶联免疫分析试剂盒使用说明书


本试剂盒仅供钻研使用。。。 。 。。。

检测领域:                                                            96T

35nmol/L - 1200nmol/L

 

使用主张:

本试剂盒用于测定全血样本中糖化血红蛋白(GHb含量。。。 。 。。。

尝试道理

本试剂盒利用双抗体夹心法测定标本大鼠糖化血红蛋白(GHb水平。。。 。 。。。用纯化的大鼠糖化血红蛋白(GHb抗体包被微孔板,,,,,,造成固相抗体,,,,,,往包被单抗的微孔中顺次参与糖化血红蛋白(GHb),,,,,,再与HRP象征的糖化血红蛋白(GHb抗体结合,,,,,,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,,,,,,经过彻底洗涤后底物TMB显色。。。 。 。。。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,,,,,,并在酸的作用下转化成最终的黄色。。。 。 。。。色彩的深浅和样品中的糖化血红蛋白(GHb呈正有关。。。 。 。。。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),,,,,,通过尺度曲线推算样品中大鼠糖化血红蛋白(GHb浓度。。。 。 。。。

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

尺度品(2400nmol/L

0.5ml×1

3

标包被

12孔×8

9

尺度品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

显色剂B

6ml×1/

12

密封袋

1

标本要求 

1.标本采集后尽早进行提取,,,,,,提取按有关文件进行,,,,,,提取后应尽快进行尝试。。。 。 。。。若不能顿时进行试验,,,,,,可将标本放于-20℃保留,,,,,,但应预防反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,,,,,,因NaN3抑造辣根过氧化物酶的(HRP)活性。。。 。 。。。

操作步骤

1. 尺度品的稀释:本试剂盒提供原倍尺度品一支,,,,,,用户可依照下列图表在幼试管中进行稀释。。。 。 。。。

1200nmol/L

5号尺度品

150μl的原倍尺度品参与150μl尺度品稀释液

600nmol/L

4号尺度品

150μl5号尺度品参与150μl尺度品稀释液

300nmol/L

3号尺度品

150μl4号尺度品参与150μl尺度品稀释液

150nmol/L

2号尺度品

150μl3号尺度品参与150μl尺度品稀释液

75nmol/L

1号尺度品

150μl2号尺度品参与150μl尺度品稀释液

 

 

2. 加样:别离设空缺孔(空缺对照孔不加样品及酶标试剂,,,,,,其余各步操作一样)、尺度孔、待测样品孔。。。 。 。。。在酶标包被板上尺度品正确加样50μl,,,,,,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,,,,,,而后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。。。 。 。。。加样将样品加于酶标板孔底部,,,,,,尽量不触及孔壁,,,,,,轻轻晃悠混匀。。。 。 。。。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。。。 。 。。。   

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤:幼心揭掉封板膜,,,,,,弃去液体,,,,,,甩干,,,,,,每孔加满洗涤液,,,,,,静置30秒后弃去,,,,,,如此沉复5次,,,,,,拍干。。。 。 。。。

6. 加酶:每孔参与酶标试剂50μl,,,,,,空缺孔之表。。。 。 。。。

7. 温育:操作同3。。。 。 。。。

8. 洗涤:操作同5。。。 。 。。。

9. 显色:每孔先参与显色剂A50μl,,,,,,再参与显色剂B50μl,,,,,,轻轻震荡混匀,,,,,,37℃避鲜明色10分钟.

10. 终止:每孔加终止50μl,,,,,,终止反映(此时蓝色立转黄色)。。。 。 。。。

11. 测定:以空缺孔调零,,,,,,450nm波长依序丈量各孔的吸光度(OD值)。。。 。 。。。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。。。 。 。。。

当苦衷项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,,,,,,酶标包被板开封后如未用完,,,,,,板条应装入密封袋中保留。。。 。 。。。

2浓洗涤液可能会有结晶析出,,,,,,稀释时可在水浴中加温助溶,,,,,,洗涤时不影响了局。。。 。 。。。

3.各步加样均应使用加样器,,,,,,并时时校对其正确性,,,,,,以预防试验误差。。。 。 。。。一次加样功夫最好节造在5分钟内,,,,,,如标本数量多,,,,,,推荐使用排枪加样。。。 。 。。。

4. 请每次测定的同时做尺度曲线,,,,,,最好做复孔。。。 。 。。。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于尺度品孔第一孔的OD值),,,,,,请吓酌样品稀释液稀释肯定倍数(n倍)后再测定,,,,,,推算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。。。 。 。。。

5. 封板膜只限一次性使用,,,,,,以预防交叉传染。。。 。 。。。

6.底物请避光保留。。。 。 。。。

7.严格依照说明书的操作进行,,,,,,试验了局判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,,,,,,洗涤液和各类拔除物都应按传染物处置。。。 。 。。。

9.本试剂分歧批号组分不得混用。。。 。 。。。

保留前提及有效期

1试剂盒保留:;;;;;;2-8℃。。。 。 。。。

2.有效期:6个月

 



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