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说话:Eng

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根基信息 |
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资源编号 |
HYX-400025 |
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资源名称 |
人胚肾细胞 |
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种属 |
293T |
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类型 |
贴壁成长 |
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状态 |
CM1-1造就液中,,,,,,,,贴壁,,,,,,,,上皮细胞样,,,,,,,,多角形,,,,,,,,缜密分列 |
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分离基物 |
胚肾;;;;;5型腺病毒及SV40转化;;;;;女性 |
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提供大局 |
复苏大局:T25造就瓶1瓶;;;;;或者冻存大局;2ml冻存管2支,,,,,,,,干冰费另计。。。。。。。 |
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安全等级 |
1 |
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模式菌株 |
未知 |
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利用领域 |
表白SV40大T抗原,,,,,,,,可用于转染和作为包装细胞;;;;;用于瞬时转染时可高表白AP融合蛋白。。。。。。。293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,,,,,,,,293T细胞由293细胞派生,,,,,,,,同时表白SV40大T抗原,,,,,,,,含有SV40复造肇始点与启动子区的质???????D芄桓丛。。。。。。。@2017 |
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造就步骤 |
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传代步骤 |
将旧造就液吸除,,,,,,,,PBS洗濯两遍后,,,,,,,,参与6mL(/100mm皿)胰酶,,,,,,,,在显微镜下观察,,,,,,,,期间不容摇摆造就皿,,,,,,,,细胞刚有脱落时,,,,,,,,则吸除大部门胰酶,,,,,,,,留约0.5mL,,,,,,,,移至造就箱消化,,,,,,,,约2min取出。。。。。。。传代用12mL CM1-1造就液终止消化,,,,,,,,轻轻奏乐均匀细胞,,,,,,,,后可分3~6皿造就;;;;; |
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成长前提 |
37℃,,,,,,,,5%CO2,,,,,,,,CM1-1造就液。。。。。。。CM1-1造就液:90%DMEM-H+10%FBS。。。。。。。DMEM-H:DMEM高糖造就液,,,,,,,,含谷氨酰胺,,,,,,,,含丙酮酸钠。。。。。。。 |
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成长个性 |
细胞贴壁不牢,,,,,,,,加胰酶消化时,,,,,,,,细胞会成块脱落,,,,,,,,过一会就要把有余的胰酶吸走。。。。。。。造就过程中增殖缓慢,,,,,,,,细胞密度或许在70%左右。。。。。。。 |
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存储前提 |
冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,,,,,,,,奏乐均匀,,,,,,,,分为6支冻存管,,,,,,,,用法式降温盒于-80℃冻存,,,,,,,,过夜转移至液氮中保留。。。。。。。 |
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